高效液相色譜儀(HPLC)是一種常用的分析儀器,用于分離和鑒定復(fù)雜混合物中的各種成分。在使用HPLC進行分析之前,需要對色譜柱進行沖洗,以確保柱子的清潔和高效運行。以下是HPLC沖洗柱子的基本步驟:
一、準(zhǔn)備工作
1. 關(guān)閉HPLC系統(tǒng)的電源。
2. 從系統(tǒng)中取出色譜柱。
3. 準(zhǔn)備好所需的溶劑,如純水、甲醇或乙腈等。
二、沖洗步驟
1. 首先用純水沖洗柱子,每次沖洗50毫升,共沖洗兩次。這一步主要是去除柱子內(nèi)的雜質(zhì)和殘留物。
2. 接著用甲醇沖洗柱子,每次沖洗50毫升,共沖洗兩次。這一步主要是去除柱子內(nèi)的水分,因為甲醇可以很好地清除水分。
3. 如果需要進一步清潔柱子,可以用異丙醇或正己烷等有機溶劑進行沖洗。每次沖洗50毫升,共沖洗兩次。這一步主要是去除柱子內(nèi)的有機雜質(zhì)。
4. 最后,用純水再次沖洗柱子,每次沖洗50毫升,共沖洗兩次。這一步主要是恢復(fù)柱子的原始狀態(tài),防止殘留的有機溶劑對后續(xù)分析造成干擾。
三、安裝柱子
1. 將沖洗過的色譜柱重新插入HPLC系統(tǒng)。
2. 打開HPLC系統(tǒng)的電源,進行系統(tǒng)校準(zhǔn)和維護。
四、注意事項
1. 在沖洗過程中,要注意觀察柱子的顏色變化,如果發(fā)現(xiàn)柱子變黃或者有其他異常現(xiàn)象,可能是柱子受到了污染,需要重新沖洗。
2. 在沖洗過程中,要注意控制好溶劑的流量和沖洗的時間,以免損傷柱子。
3. 在沖洗過程中,要注意避免讓溶劑接觸到電子元件,以免損壞電子元件。
4. 在沖洗過程中,要注意定期更換溶劑,以免溶劑變質(zhì)影響分析結(jié)果。
HPLC沖洗柱子的步驟包括準(zhǔn)備工作、純水沖洗、甲醇沖洗、有機溶劑沖洗和最后一次純水沖洗,以及安裝柱子和系統(tǒng)校準(zhǔn)。在整個過程中,需要注意觀察柱子的顏色變化,控制好溶劑的流量和沖洗的時間,以及定期更換溶劑。
發(fā)布于: 2023-09-11