? ? ? ?當樣品被引入填充有多孔顆粒的色譜柱時就開始液相色譜分離過程了。樣品被注入并通過流動的液相（流動相）輸送通過色譜柱。當分析物遇到固定相時，它們會在不同程度上與其相互作用，并分離成可以分析或收集的純區(qū)域。對固定相具有強親和力的分析物將在色譜柱上停留更長時間。
? ? ? ?液相色譜柱的柱效是評價色譜性能的一項因素。樣品組分是否能在色譜柱中分離，同時取決于固定相的選擇、色譜操作條件和填料狀況。一般來說，塔盤數(shù)越多色譜柱的分離效率越好；或者說塔盤高度越小色譜柱的分離效率越好。今天，恒譜生將討論如何提高 HPLC的柱效。
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一、什么是柱效：
? ? ? ?效率是衡量某物效率的指標，換句話說，它的工作可以做得有多好。對于色譜柱，效率是指分離的質(zhì)量。高分辨率導致窄峰占用更少的空間，這意味著可以分離更多的峰。這是高效色譜柱的基本定義，它是用平板計數(shù)理論表示的。
二、什么是塔板計數(shù)：
? ? ? 塔板計數(shù)是列由多個單獨的板組成的理論。在分析過程中樣品通過色譜柱從一塊板移動到另一塊板，在每一步都與固定相相互作用。
三、什么影響柱效：
? ? ? 塔板計數(shù)公式提供了一些明確的方法來增加理論塔板數(shù)從而提高效率。首先是增加保留時間，這是通過增加色譜柱長度來實現(xiàn)的，這樣流動相和分析物就需要更長的時間通過。接下來是底部的峰寬。這是色譜圖中峰開始和結(jié)束的點之間的距離。一般來說，這是由色譜分離度決定的。高分辨率會導致更小的峰寬，而低分辨率導致更寬的峰。影響分辨率的因素有很多，包括色譜柱柱管長度、粒徑、溫度和體積。然而，這可能只是因為色譜柱在持續(xù)使用后會失去其分離能力。
四、提高HPLC柱效可從以下幾個方面入手：
(1)降低流動相流速，但會增加分析時間。
(2)固定相用量減少，但色譜柱上樣量也減少。
(3)減小固定相的粒徑，但不能過多，過多后色譜柱的滲透性也會下降。
(4) 采用低粘度的流動相有利于快速傳質(zhì)，但不利于多組分分析。
(5)適當提高柱溫可以降低流動相的黏度，但柱效和分離度也會降低。
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? ?今天恒譜生分享的知識先到這啦，希望對您的工作有所幫助！
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發(fā)布于: 2023-04-22